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舜宇恒平符合國標(biāo)的三聚氰胺快速液相色譜檢測法
點擊次數(shù)：2765 更新時間：2009-01-22
上海舜宇恒平科學(xué)儀器有限公司按照GB/T 22400-2008 《原料乳中三聚氰胺快速檢測 液相色譜法》，對鮮牛奶中三聚氰胺進(jìn)行快速檢測，經(jīng)優(yōu)化色譜條件，三聚氰胺的出峰時間在7min左右，并能與雜質(zhì)峰達(dá)到基線分離，完整分析一個樣品（包括前處理）的整個實驗過程在20min以內(nèi)。
1.儀器與試劑
LC1620液相色譜儀（含UV1620紫外-可見檢測器1臺，P1620高壓恒流泵1臺，上海舜宇恒平科學(xué)儀器有限公司）；FA2004電子分析天平（上海舜宇恒平科學(xué)儀器有限公司）；三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)品（>99%，上海安譜）；磷酸二氫鉀（分析純）；磷酸（分析純）、乙腈（色譜純，美國Tedia）、二次蒸餾水。
2.標(biāo)準(zhǔn)品溶液配制
精密稱取三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)品，溶于水，配制成1.0mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲備液，于4℃避光保存。根據(jù)實驗需要，用流動相逐級稀釋成適當(dāng)濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作液。
3.樣品前處理
稱取15g樣品于50ml具塞離心管中，加入乙腈30ml，劇烈震蕩6min，加水至滿容刻度，充分混勻后靜置3min，取上清液，0.22um濾膜過濾，作為HPLC測定溶液。
4.色譜條件：
色譜柱：Venusil SCX 5μm（ID4.6mm×250mm）
流動相：乙腈/緩沖鹽=30/70（緩沖鹽：80mM磷酸緩沖液，用磷酸調(diào)pH3.0）
流速：1.5ml/min
波長：240nm
進(jìn)樣量：20μl
5.精密度實驗
取濃度為2μg/mL三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)工作液，按上述色譜條件，連續(xù)進(jìn)樣6次，以各成分峰面積計算RSD（%），所得結(jié)果如表1所示：保留時間相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）為0.10％，峰面積RSD為0.69％。
表1 精密度實驗
| NO. | Retention time（min） | Peak High | Peak Area |
| 1 | 7.240 | 1060 | 9854.7 |
| 2 | 7.232 | 1062 | 9815.3 |
| 3 | 7.223 | 1043 | 9805.0 |
| 4 | 7.223 | 1088 | 9869.5 |
| 5 | 7.223 | 1052 | 9681.4 |
| 6 | 7.223 | 1070 | 9841.3 |
| RSD（%） | 0.10 | 0.96 | 0.69 |
圖1 三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖
6.標(biāo)準(zhǔn)曲線
1） 配置濃度分別為0.2、0.5、2.0、5.0、20.0、50.0μg/mL的三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)工作液。將以上6種標(biāo)準(zhǔn)工作液在上述色譜條件下按濃度由低至高進(jìn)樣。以對照品濃度（橫坐標(biāo)X軸，μg/mL）對峰面積（縱坐標(biāo)Y軸）進(jìn)行線性回歸，求算標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果如下：
y = 4810.3x + 137.52 r = 0.9999
2） 配置濃度分別為0.005、0.01、0.02、0.5、0.2μg/mL的三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)工作液。將以上5種標(biāo)準(zhǔn)工作液在上述色譜條件下按濃度由低至高進(jìn)樣。以對照品濃度（橫坐標(biāo)X軸，μg/mL）對峰面積（縱坐標(biāo)Y軸）進(jìn)行線性回歸，求算標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果如下：
y = 4116.2x + 17.618 r＝0.9992
7.加樣回收率和重現(xiàn)性實驗
取已知三聚氰胺含量的牛奶樣品，加入一定量的標(biāo)準(zhǔn)儲備液，按“樣品前處理” 操作，平行制備3份，得到樣品溶液后按上述色譜條件進(jìn)樣分析，得到加樣回收率及重現(xiàn)性結(jié)果，三次測定RSD為1.89％，加樣回收率為100.6％。
圖2 空白牛奶樣品色譜圖
圖3 加標(biāo)牛奶樣品色譜圖
8.檢測限及定量限
依據(jù)噪聲值，按3倍信噪比，計算三聚氰胺的理論檢出限，為0.04 mg/kg。
具體內(nèi)容進(jìn)行咨詢。
上海舜宇恒平科學(xué)儀器有限公司是上海市高新技術(shù)企業(yè)，專業(yè)致力于各類科學(xué)儀器的研發(fā)、制造和銷售。公司與多所高校、科研機(jī)構(gòu)建立了密切的合作聯(lián)盟，多次承擔(dān)上海市科委科學(xué)儀器攻關(guān)項目，已成為科學(xué)儀器的產(chǎn)學(xué)研自主創(chuàng)新基地。公司已形成在四大領(lǐng)域，即分析儀器、天平儀器、物性測試儀器和前處理儀器共計一百多個品種的數(shù)字化、智能化產(chǎn)品，建立了與顧客的營銷網(wǎng)絡(luò)，客戶遍及海內(nèi)外。
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